蜘蛛毒液的提取与制备

(一)蛛毒提取
1.准备工作
(1)对蜘蛛毒腺中毒液含量的掌握:蜘蛛毒腺的含毒量,因品种不同而有所差异。目前已知虎纹捕鸟蛛和海南捕鸟蛛每对毒腺内的含毒量约为120微升,雷氏大疣蛛的含毒量约为20微升。掌握了各种蜘蛛的含毒量,采毒时就能做到心中有数。
(2)器材准备:采毒用的器材必须事先准备齐全。这些器材有如下几种。
①电脉冲取毒仪,主要采用电脉冲刺激毒蛛螯肢而收集毒液。
②低温冰箱或冰柜,用来贮藏蛛毒。
③冷冻离心机,用做毒液消除杂质处理。
④真空冰冻干燥机,用来将毒液制成干燥的粗毒。
⑤电子分析天平,用做毒液和粗毒计量。
⑥采毒用的烧杯、玻璃器皿、安瓿和微量吸管等。使用前均需清洗、消毒、烘干。要求无油渍,不沾有水滴。
⑦采毒人员必须戴上乳胶手套,备有治疗毒蛛刺伤的药物。蛛毒液在分装时每瓶安瓿的容量以800微升为宜。冰干后每瓶都要贴上标签,注明蜘蛛种类、采毒日期和冻干日期,放人低温冰箱内保存。


2.提取方法
蛛毒的提取方法有多种,这里只介绍电脉冲刺激采集法。该法操作简便,取毒量高,质量保证,而且不伤害蜘蛛。它通过电脉冲刺激装置,连续感应刺激蜘蛛排毒。电脉冲刺激装置由脉冲发生器和刺激神经电极组成。操作方法:先将按钮调节到连续感应电刺激档,调频档调至128赫兹,电压为10~20伏,波长为2~4毫秒。用两个电极夹将蜘蛛的一个螯肢连接“刺激输出”电极,另一个螯肢连接地线,然后启动该装置的开关刺激蜘蛛排毒。操作者左手抓住蜘蛛,要做到松紧适度,既不损伤蜘蛛,又不让它逃跑。在电刺激过程中如有不良反应,即用生理盐水在电极与螯肢接触处湿润一下。电刺激时如发现蛛体或步足爆裂渗出体液时,应立即停止取毒,将蜘蛛放回养殖箱内调养。将收集到的毒液分装在玻璃试管内,经离心处理除去杂质后,冰冻3~4小时,然后进行干燥。


(二)蛛毒加工
1.蛛毒真空冰冻干燥
刚提取的蛛毒,是一种含水率较高的蛋白质,在常温下很容易失去活性。为了除去蛛毒中的水分,并保持其生物活性和便于运输,通常采用真空冰冻干燥的方法制成蛛毒干品。真空冰冻干燥,是在低温条件下,使蛛毒所含的水分随着真空干燥器内的压力减少而逐渐蒸发。真空度越高,蒸发越快。经真空冰冻干燥处理制得的蛛毒干品。具有溶解度高、质地疏松、能保持蛋白质和酶类活性等优点。
蛛毒进行真空干燥时,要注意以下事项:
(1)刚提取的新鲜毒液,须放人低于零下40℃的冰柜中预冻3小时以上。
(2)用安瓿盛装的毒液不要装得过满,每瓶不得超过800微升。
(3)每次只能干燥一种蛛毒。
(4)要求1次干燥完毕,中途不宜停机。
(5)干燥后的蛛毒,立即加盖、密封。
(6)整个操作过程不可用手直接接触蛛毒。

2.蛛毒的贮藏
干燥后的蛛毒,一般是置于棕色安瓿中密封,然后外包黑色纸置于阴凉、干燥处避光保存;亦可放在冰箱或冰柜内保存。不同品种、不同批号的蛛毒应分批包装,不可混淆。
八、蜘蛛蜇伤的处理方法
在饲养、采毒过程中,难免有时被蜘蛛蜇伤。被蜇伤部位往往留下针眼大的伤口,严重时出现局部红肿并不断扩大。接着蜇伤伤口的远心端很快发生剧烈疼痛,令人难以忍受。有些伤者大汗淋漓,头昏嗜睡,困倦无力,眼睑下垂或腹痛呕吐;严重者出现呼吸困难,脉搏跳动缓慢,心律不齐,视物不清。以下是救治方法。
(1)被蜘蛛蜇咬后,立即用点燃的火柴或烟头灼烧伤口处,以高温破坏其毒素。此法须在毒素扩散之前即被蜇伤1~2分钟内进行。
(2)用生姜捣碎后敷在伤口处,或用o.2%~o.5%高锰酸钾溶液涂洗伤口。
(3)用熟烟丝涂抹伤口和红肿部分。严重者用熟烟丝6克、雄黄10克、梅片0.2克,共研为细末,以温开水漱服。
(4)秦艽250克,水煎,当茶频饮。
(5)静脉注射10%盐酸普鲁卡因,或注射10%~25%硫酸镁溶液10~20毫升。
(6)症状严重或休克的病人,静脉注射或皮下注射o.5~1毫克肾上腺素。
 

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