蛛毒的提取方法

(1)解剖分离毒腺匀浆提取方法

从毒蛛头胸部眼区前缘与螫基交界处解剖取出毒腺,经 冰冻6~12小时后,进行真空冰冻干燥,将干燥的毒腺放在 2—3倍蒸馏水中进行匀浆,然后离心(4。c,2 000转/分,15分 钟),取上清液。向沉淀物中加等体积的蒸馏水,并用1摩 尔/升醋酸调至pH值为4.0进行匀浆,再离心,取上清液。如 此反复3次,直至上清液中测不出抗菌活性为止。最后将3 次上清液合并,经一40℃冰冻3~4小时后进行真空冰冻干 燥,制成干粉即为粗毒。

(2)解剖分离毒腺玻璃毛细管收集方法

从毒蛛头胸部眼区前缘与螯基交界处解剖取出毒腺,然 后用带有气囊的玻璃毛细管探入毒囊中,通过挤压气囊吸取 毒液。将吸取到的毒液收集到圆形玻璃试管(规格为6厘 米×1.5厘米)中,经离心后冰冻3—4小时,再进行真空冰冻 干燥,制成千粉即为粗毒。

(3)用软管作诱物刺激排毒法

将4.5根长约4厘米、内径为1.5毫米的透明塑料软管 捆成一束作为诱物。取毒时,用大镊子从侧面夹住蜘蛛头胸 部。然后将软管束送入蜘蛛螯牙下诱使其将螯牙刺人软管内 排毒,经反复诱使排毒后,立即抽出软管束,用微量注射器吸 收毒液,再收集到圆形玻璃试管中,经离心后冰冻3—4小时, 进行真空冰冻干燥,制成千粉即为粗毒。

(4)电脉冲刺激采集方法

电脉冲刺激采集方法是通过电脉冲刺激装置连续感应刺 激蜘蛛排毒。电脉冲刺激装置是由脉冲发生器和刺激神经电 极组成。操作时将按钮调节到连续感应电刺激档,调频调到 128赫兹,电压为10~20伏,波宽为2~4毫秒,用两个鳄鱼型 电极夹将蜘蛛一螯肢接刺激输出,另一螯肢接地线,然后启动 装置开关束刺激蜘蛛排毒。操作时,左手抓住蜘蛛,做到紧而不 使蜘蛛产生疼痛感觉、松而不让蜘蛛逃脱。刺激过程中,若有 不反应者,用生理盐水在电极与螯肢接触处润湿一下。刺激 时如发现蛛体或步足爆裂渗出体液时,应立即停止取毒,将蜘 蛛放回饲养箱内调养。将收集到的毒液分装进圆形玻璃试 管,经离心处理后冰冻3。4小时,再进行真空冰冻干燥,制成 千粉。使用电脉冲装置采毒,获得的毒液比解剖分离毒腺和 以软管诱取方法速度快,操作简便,取毒量多,质量保证,而且 不伤害蜘蛛,每隔3—4周可取毒1次。

(5)负压式采毒方法

负压式采毒方法的原理是通过负压采毒装置发生的负效 应作用进行采毒。负压装置由取样泵、听诊胶管、玻璃瓶管 道、输液滴管、盛毒指管、玻璃毛细管和电脉冲刺激装置构成。 操作时,将取样泵接触电源,调整电流至30—40伏,用左手夹 稳蜘蛛头胸部,右手持玻璃毛细管将探头探入蜘蛛螯牙小孔 内,探人深度为2.3厘米,毒液便自动被吸入盛毒指管,然后 将指管内的毒液

分装进圆形玻璃试管内进行离心处理,冰冻 干燥。 取毒的适宜季节是5。10月,取毒的最佳温度为24— 28。C,相对湿度为30%左右。所制取的粗毒要置于棕色安瓿 中密封,外包黑色纸,标明蜘蛛种类、取毒日期,然后放置阴凉 避光处或冷藏。
 

蛛毒的提取方法

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